1. 全基因合成可以应用到哪些方面？

全基因合成的应用有：

（1）通过密码子优化，提高外源基因的表达量。

（2）序列已知，但难以获得生物样品的基因。

（3）表达条件苛刻，表达丰度极低的基因。

（4）人工设计的各种基因。

（5）人工设计的核酶。

（6）用于DNA芯片的大量cDNA。

（7）对基因进行各种人工改造。您还可以想到更多有创造性的应用。

2. 全基因能合成多长的片段？

理论上没有长度限制。但是由于克隆技术，载体容量等因素存在，一般全基因合成长度不超过10kb。我们可以完成10kb以下的全基因合成。

3. 密码子优化有必要吗？

对于用于蛋白表达的基因来说，多数情况下是有必要的。比如真核生物的基因需要在原核生物中表达。由于真核生物的密码子偏好和原核生物有很大不同，对基因进行密码子优化将显著提高表达效率。有客户反馈经过我们优化后的序列比原序列的表达量提高了3-5倍。
 

4. 三博远志全基因合成使用什么载体？

我们一般使用根据序列情况，选用pGEM-T或pUC19。

5. 全基因合成需要多长时间？

对于500bp以下的片段，合成周期是10个工作日。500-1000bp的片段，合成周期是12个工作日。更长的片段每增加1kb，需要的时间增加7个工作日。

6. 全基因合成的步骤是什么？

全基因合成包括：设计合成引物；合成全序列；修改错误序列；克隆到载体；测序验证。

7. 如果我需要亚克隆到其它载体怎么办？

我们可以帮您将合成好的全基因连接到您感兴趣的载体。这个过程需要适当收取克隆费用。我们可以提供多种真核和原核的表达载体，欢迎您联系我们的客服人员查询使用。

8. 为什么选择全基因合成而不是PCR克隆？

PCR克隆需要提取表达基因的组织或细胞的RNA，反转录为cDNA，再从cDNA扩增出目的基因。实验步骤多，要求严格，工艺复杂。如果没有合适的样品，还必须购买商业的cDNA库，价格昂贵。就算克隆成功，获得了基因片段，也不能对基因序列进行任何修改。任何突变体都必须通过后续的突变步骤得到。密码子优化就更不可能了。PCR克隆的另一个重大局限是对表达丰度低的基因、表达时间极短的基因等特殊基因难以成功克隆。比较而言，全基因合成是一种更加灵活，更容易成功而且价格更便宜的克隆方法。